高效液相色谱柱的运用和维护办法

  在色谱剖析体系中首要起着别离检测物质的效果，好像色谱体系的心脏，一起也是易损耗品。因此在高效液相色谱仪的运用中，坚持色谱柱的柱效、容量和浸透粉性，延伸柱子的惯例运用的寿数很重要。下面来介绍一下色谱柱的运用和维护办法。

  (1)柱子在装卸、替换时，动作要轻，接头拧重要适度。有必要避免较强的机械振动，避免柱床发生空地。

  (2)假如仪器用来做惯例剖析，样品品种有限，但剖析次数多，则无妨为每一类惯例剖析装备一根专用柱，这样有助于延伸柱子的寿数。

  (3)避免压力和温度的急剧改动及任何机械轰动。温度的忽然改动或许使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充情况;柱压的忽然升高或下降也会激动柱内填料，因此在调理流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的滚动不能过缓。

  (4)应逐步改动溶剂的组成，特别是反相色谱中，不该直接从有机溶剂改动为全部是水，反之亦然。

  (6)一般说来色谱柱不能反冲，只要生产者指明该柱能够反冲时，才能够反冲除掉留在柱头的杂质。不然反冲会敏捷下降柱效。

  (7)挑选运用适合的活动相，以避免固定相被损坏。有时能够在进样器前面衔接一个预柱，剖析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使活动相在进入剖析柱之前预先被硅胶“饱满”，避免剖析柱中的硅胶基质被溶解。

  (8)避免将基质杂乱的样品尤其是生物样品直接注人柱内，需求对样品进行预处理或许在进样器和色谱柱之间衔接一个维护柱。维护柱一般是填有类似固定相的短柱。维护柱能够并且应该常常替换。

  (9)常常用强溶剂冲刷色谱柱，铲除保留在柱内的杂质。在进行整理洗刷时，对流路体系中活动相的置换应以相混溶的溶剂慢慢地过渡，每种活动相的体积应是柱体积的20倍左右，即惯例剖析需求50-75mL。

  (10)保存色谱柱时应将柱内充溢乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，避免溶剂蒸发枯燥。肯定制止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时刻。

  (11)色谱柱运用的过程中，假如压力升高，一种或许是烧结滤片被阻塞，这时应替换滤片或将其取出进行整理洗刷;另一种或许是大分子进人柱内，使柱头被污染;假如柱效下降或色谱峰变形，则或许柱头呈现陷落，死体积增大。

  (12)在完结别离剖析作业之后，不该当即停机，需及时对色谱剖析体系来进行冲刷，一般0.5h以上，以除掉色谱柱内的杂质。